分別在有lactose、無lactose、glucose濃度高、glucose濃度低的情況下,operon是否會進行轉錄?其中,inducer及activater扮演的角色是什麼?當operator或repressor序列有缺陷時,將如何影響operon的轉錄?本篇文章將介紹Lac operon的調控方式及應用,並利用列項說明及表格方式呈現。
名詞介紹
- Operon:由一群可以一起被同一組promoter/operator控制的基因所組成。
- Lac operon:由同一組promoter/operator來控制代謝乳酸(lactose)的基因。
- lactose(乳糖)為雙醣,由galactose(半乳糖)和glucose(葡萄糖)形成β-glycosidic bond相連。
- lacZ (β-galactosidase):將lactose分解成galactose和glucose。
- lacY (galactoside permease):將lactose transport到細胞內。
- lacA (thiogalactoside transacetylase)。
- lacI (lac repressor)。
Lac operon運作方式
先說明大方向,若要Lac operon轉錄,「有lactose」是必要條件,一定需要有lactose,Lac operon才會轉錄,lacZ、lacY、lacA才會表現。而「glucose的濃度高或低」,是附加條件,若glucose的濃度低,則促進轉錄。
在細部說明lactose的有無,及glucose的濃度高或低對Lac operon運作的影響前,需要先理解Inducer及activator的功能。
Inducer
allolactose(異乳糖)
allolactose 為β-1,6 linkage,是和lactose(β-1,4 linkage)相似的雙醣。
lactose可靠β-galactosidase作用形成allolactose。而在沒有permease及β-galactosidase的情形下,因為lac operon會leaking(漏一些些),所以能把小量的lactose切成allolactose(異乳糖)。
IPTG
IPTG(Isopropylthiogalactoside、Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside)為人工合成,是allolactose的analog(結構類似物),會結合repressor。
因IPTG不被分解,所以又稱為持續型inducer。
activator
cAMP-CAP complex
lac operon上有CAP site,其為cAMP-CAP complex的結合處。當cAMP-CAP complex結合於CAP site,會促進lac gene轉錄。
接著,是在不同情況下,對於Lac operon運作所產生的影響。
Lac operon的調控
無lactose的情況下
lacI做出repressor後,repressor結合operator,導致RNA polymerase無法啟用,造成lac gene無法轉錄,所以lacZ、lacY、lacA不表現。
有lactose的情況下
inducer結合repressor後,repressor無法結合operator,此時RNA polymerase可以啟用,lac gene 可以轉錄,所以lacZ、lacY、lacA順利表現。
glucose濃度低的情況下
glucose濃度低,增加cAMP的形成。cAMP與CAP組合成cAMP-CAP complex後,再結合於CAP site,促進lac gene轉錄。
glucose濃度高的情況下
glucose濃度高,抑制cAMP的形成。cAMP無法與CAP組合成cAMP-CAP complex,也無法再結合於CAP site,所以不會促進lac gene轉錄。
綜合比較
lactose | repressor | glucose | CAP site | lac gene |
---|---|---|---|---|
有 | 無法結合operator | 濃度低 | 與cAMP-CAP complex結合 | 轉錄 |
有 | 無法結合operator | 濃度高 | 無cAMP-CAP complex結合 | 有些轉錄 |
無 | 結合operator | 濃度低 | 與cAMP-CAP complex結合 | 不轉錄 |
無 | 結合operator | 濃度高 | 無cAMP-CAP complex結合 | 不轉錄 |
Lac operon的應用
Oc
表示operator的序列有缺陷,使repressor無法結合operator。
所以,在有lactose及沒有lactose的情況下,lac operon都會持續轉錄。
lacI–
表示repressor可以結合operator的位置有缺陷,導致repressor無法結合operator。
所以,在有lactose及沒有lactose的情況下,lac operon都會持續轉錄。
lacIs
表示repressor可以結合lactose的位置有缺陷,導致repressor無法與lactose結合。
所以,在有lactose及沒有lactose的情況下,lac operon都會無法轉錄。